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王 慧

吉林省疾病预防控制中心微生物所，吉林长春 130000

[摘要] 目的 分析和观察流感病毒核酸监测的结果，探寻甲型HINI流感病毒与季节性的流感病毒在临床上的流行规律，并研究甲型HINI流感和季节性流感之间的关系。方法 通过对本地区从2012年8月—2013年7月流感监测点流感样病人的咽拭子标本，使用Real-time RT-PCR的方法进行检测，并对检测出的数据进行详细的分析和对比。结果 本研究检测流感样病例咽拭子标本共930份，总阳性率是20.3%，男、女阳性率分别是22.2%~25.9%，其差别没有统计学意义(P＞0.05)，在各年龄组中，0~5岁年龄组所采集的标本最多，而60岁以上组所采集的标本最少。60岁以下阳性率和60岁以上年龄组阳性率对比，其差别有统计学意义（P＜0.05)。在时间分布上，流感样患者就诊出现了两个暴发高峰，甲流H1N1流感病例出现在2012年10月~11月，随后就呈现出逐月下降的趋势,而季节性流感的就诊高峰出现在2013年2月。结论 流感主要的发病群体是中小学生和青年群体；作为季节性流感的流行趋势株仍是乙型流感病毒，甲型HINI流感病毒的出现，并没有造成季节性流感的流行特征出现变化。

[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ] 核酸检测；甲型H1N1流感；流行病原

[中图分类号] R440　　　[文献标识码] A　　　[文章编号] 1672-5654（2014）03（c）-0142-02

流感属于人类所面临重要的公共健康问题之一，又是第一个实现全球化监测的传染性疾病[1]。因为流感病毒抗原非常容易出现变异，所以会引起暴发性的流行，造成人类目前还无法对流感流行实施科学有效的控制。我国属于流感的多发区域，中国的流感动态正受到全世界的普遍关注[2]。流感监测是目前有效地预防流感的关键策略与措施之一，也是用来确定流感流行株与推荐疫苗组份以及早期发现变异株，从而进行流感疫情的预测与预警的基础[3]。为了更好地掌握本地区流感的流行规律，全面了解甲型H1N1流感病毒的流行能否引起季节性流感流行的特征以及其发生的改变，现将本地从2012年8月—2013年7月流感病毒核酸检测的结果进行了分析和研究，以便于更好地掌握预测，也为制定有效的控制流感措施提供更为科学的依据。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

收集的资料来自本地区从2012年8月—2013年7月在两医院的流感监测点收集的就诊流感样病患共930份病例作为检测对象，患者的发热体温均达到38度以上，并伴随有咳嗽、咽痛以及全身疼痛等症状表现，排除已经在实验室经过明确诊断为急性呼吸道感染的症状现象。其中，男性病例共475例，女性病例共455例。

1.2标本的采集及运送

每周采集在发病3 h内，没有服用过抗病毒类药物的流感患者的咽拭子标本20~30份。迅速放置在无菌的DMEM病毒采集液以后，在4~8℃的条件下进行保存，并及时地送到实验室内进行病原学的检测。对于甲型流感病毒与乙型流感病毒的核酸检测，运用RT-PCR Kit的试剂盒，引物序列和探针以及阳性对照参照国家流感中心提供的标准[4]，甲型H1N1流感病毒则运用RT-PCR方法进行核酸检测。

1.3观察指标

通过对检测流感样病例咽拭子标本进行统计，观察各年龄段流感病毒的阳性率，对比男女阳性的差别，通过发病季节指数，流感样患者就诊出现了两个暴发高峰周期时间分布情况。

1.4 统计学方法

通过建立Exel数据库，对所收集的数据，运用描述性的流行病学方法实施详细的分析，依照spss 18.0统计学软件进行综合统计分析。

2结果

本研究检测流感样病例咽拭子标本共930份，其中，阳性标本189份，总阳性率是20.3%，男、女阳性率分别是22.2%（42例）与25.9%（49例），男女阳性率差别没有统计学意义(χ2= 0.392 ，P>0.05)，流感病毒侵袭的主体是中小学生群体，其次是青年群体。在各年龄组中，0~5岁年龄组所采集的标本最多（369例），60岁以上组所采集的标本最少（11例）。60岁以下阳性率和60岁以上年龄组阳性率对比，其差异有统计学意义(χ2=90.62 , P＜0.05)。见表1。

表1 流感病毒核酸测年龄组阳性率结果对比

在时间分布上，流感样患者就诊出现了两个暴发高峰，甲流H1N1流感病例出现在2012年10月~11月，随后就呈现出逐月下降的趋势,而季节性流感的就诊高峰出现在2013年2月。

3讨论

使用Real time RT-PCR检验方法针对咽拭子的标本实施流感病毒核酸的检测，并对于流感病毒的变化状况实施全年度的监测，除了能够快速地得出检测结果，而且检测出的流感病毒的特异性与敏感度都比以前的病毒分离方法有较大提高[5]。因此，该种方法能够及时并准确地反映出流感活动不断变化的趋势。

通过从2012年8月—2013年7月通过流感病毒核酸进行检测的结果进行分析可以证实，流感病毒侵袭的主体是中小学生群体，其次是青年群体。因为这一部分的人群比其它人群相对来说比较集中，特别是学龄儿童群体对流感的免疫力较差，极其容易造成疫情的快速传播。然而作为高年龄组的群体，因为受到感染各型流感的机会较多，其体内流感的抗体对于流行甲型H1N1的流感病毒，可能提供一定程度上的交叉保护作用。

据Shaw MW等[6]有关文献报道，近些年来B型流感病逐渐向全球范围内呈扩散蔓延的趋势。流感病毒目前在我国的活动规律是季节性极强。在2012年9月份，因为甲型H1N1流感病毒的原因，使本地区甲型H1N1流感病毒的流行在2012年10月份到11月份出现了第一个发病高峰期，该数据提示甲型HINI流感病毒已经在广泛地流行。随后每月出现逐渐下降趋势，一直到2013年2月份才消失。这有可能和甲型H1N1的流感病毒传播十分快速，结果形成了一定的自然免疫屏障，或者是和易感人群积极大规模地接种甲型H1N1流感病毒疫苗有密切关系[7]。伴随着甲型H1N1流感病毒的每月的流行下降，季节性的流感开始进入流行的周期，这和以前的流感监测结果比较一致。

本研究证明，流行感病毒样病的就诊高峰期和流感病毒阳性检测的高峰期的出现时间相同，季节性流感的流行特征不会因为甲型H1N1流感的增长而产生规律性的流行而发生变化。因此上通过PCR核酸检测的技术，能够广泛地运用在流感病毒监测中，从而来提高监测系统的灵敏度，让监测出来的结果更具有科学性与代表性[8]。另外，加强流感病原学的及时监测，不仅可以更好地了解到流感病毒株的抗原变异性，还可以针对于预测流感的流行趋势、新型性流感病毒的早期发现以及特异性药物与疫苗的开发与研究等发挥重要的作用，并能在流感的预防与控制工作产生关键的积极意义。

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参考文献]

[1] 张兰荣,赵凤玲,罗宇馨,等.应用3种流感病毒检测方法检测流感样病例病原结果及分析[J].中国卫生检验杂志，2010,15(5):137.

[2] 曾照丽，自瑞婷，张晓曦.北京市朝阳区2005-2006年流感病原学检测分析[J].现代预防医学.2007,34(22):4356-，4357.

[3] 张倩文，工秀萍.2000—2005年人连市流感IK:测分析[J].预防医学论坛，2007,13(4):344-352.

[4] 宁芳，段玮，高培，等.流感病例监测系统数据异常波动与预警分析[J].中国公共卫生，2007,23(10):1210.

[5] 吴少慧，于伟，张眉眉，等.辽宁省1995－2005年度流感病原学检测[J].中华流行病学杂志，2008,27(3):238-240.

[6] Shaw MW, XuLi Y,Normand S， et al. Reappearance and global of variants of influenza B/Victoria Lineage viruses in the2000-2001 and 2001-2002 seasons[J]. Journal of Virology，2012,37(1):539-541.

[7] 许黎黎,鲍琳琳,秦川.季节性流感病毒H1N1实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国比较医学杂志，2011,12(7):178.

[8] 皮自林,樊燕,孙菊芳,等.1342例流感样病例病毒核酸监测结果分析[J]. 中国卫生检验杂志，2011,16(6):83-85.

（收稿日期：2013-12-11）